九九精品99久久久香蕉,中文无码AV一区二区三区,精品一区二区三区无码免费直播,japanese老熟妇乱子伦视频

產(chǎn)品中心PRODUCTS CENTER
技術文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術文章 > ibidi腔室載玻片|揭示鈣成像細胞信號轉(zhuǎn)導的奧妙!

ibidi腔室載玻片|揭示鈣成像細胞信號轉(zhuǎn)導的奧妙!

更新時間:2023-06-29   更新時間:2023-06-29   點擊次數(shù):1208次

  細胞內(nèi)的鈣稱為細胞內(nèi)鈣,可受到高度調(diào)節(jié);這種緊密的調(diào)節(jié)使細胞內(nèi)鈣成為了解細胞功能和信號動力學的較佳的工具,使其能夠在細胞遷移、交流和對刺激物或異物作出反應的能力。

  

  鈣:細胞過程的多功能指示劑

   

  鈣信號可作為讀數(shù)來了解病毒在感染過程中利用宿主信號反應的能力,并剖析所涉及的信號通路。有幾種細胞內(nèi)鈣的熒光指示劑是可用于研究細胞功能;能夠檢查傷口愈合、傳染病、藥物治療等過程中的細胞反應。為此可利用含有熒光鈣指示劑的細胞的活細胞成像,其中熒光的增加表明細胞內(nèi)鈣的增加。

  

QQ截圖20230628143244.jpg

  

  鈣指示劑的種類及其應用

  

  鈣指示劑主要分為兩大類:化學指示劑和基因編碼的鈣指示劑。可用于活細胞成像實驗的鈣指示劑類型取決于預期的細胞系、成像長度以及定性或定量數(shù)據(jù)的預期結果等因素。

  

  1.預期細胞系:

  

  對于原代細胞系直接的方法是使用熒光染料,將熒光鈣指示劑簡單地添加到培養(yǎng)的細胞中,并在孵育期后成像。


  與基因編碼的鈣指示劑相比,熒光染料通常更亮、更穩(wěn)定。在活細胞成像中,熒光染料可以有效地進行短期活細胞成像,但隨著時間的推移細胞有排出染料的趨勢。鈣染料的一個重要考慮因素是使用抑制劑還是激動劑。抑制劑和激動劑也可能影響鈣染料反映,類似于在天然組織中的表達。

  

  在廣泛的鈣信號傳導實驗中,已建立的細胞系是可以被轉(zhuǎn)導以表達遺傳編碼的鈣指示劑,如GCaMP、黃色cameleon等。對現(xiàn)有的不同基因編碼鈣指示劑進行改進,使指示劑更亮,光穩(wěn)定性更好,動態(tài)范圍更大,從而提高了鈣的敏感性。慢病毒轉(zhuǎn)導是細胞系中使用的一種較佳的工具,它將允許您選擇的指示劑在細胞系中穩(wěn)定表達?;蚓幋a報告系統(tǒng)的一個潛在問題是,并非所有細胞系都容易被轉(zhuǎn)導?! ?/span>

  

QQ截圖20230628143258.jpg

 

  在用ADP 進行激動劑治療期間,人腸道類器官單層的實時、短期成像。這些有機體單層以綠色表達鈣指示劑 GCaMP6s。ADP 是一種已知的激動劑,用于在細胞中引發(fā)細胞內(nèi)鈣信號傳導。激動劑治療是測試治療劑量反應的較的好方法。

  

  2.成像長度

  

  對于活細胞成像,時間長度和間隔是需要記住的重要參數(shù)。細胞成像過程中的主要關注的是光漂白和光毒性。應避免持續(xù)使用激發(fā)光,重要的是選擇足夠強的曝光時間和光功率,以檢測鈣信號,但不要過強,以免對細胞造成損害。成像的長度將取決于實驗。對于測試激動劑或細胞反應,這通常是5-20分鐘的較短成像運行,每1-2秒捕獲一次圖像。對于研究傷口修復或病毒感染期間鈣信號傳導的實驗,我們會在18-20小時內(nèi)成像,每分鐘捕捉一次圖像?! ?/span>

  

QQ截圖20230628143312.jpg

  

  活細胞成像的技巧

  

  考慮要使用的細胞系是很重要的。為了研究鈣動力學,使用形成單層的細胞系將確保感興趣的區(qū)域保持聚焦,以捕捉信號動力學,從而獲得較佳質(zhì)量的視頻和清晰的量化。對于涉及細胞間通訊和鈣動力學的實驗,細胞系融合也是一個重要的考慮因素。為了獲得質(zhì)量的圖像,選擇合適的載玻片非常重要。有些細胞培養(yǎng)物更喜歡玻璃載玻片而不是光學級塑料載玻片,因此最好測試腔室載玻片。我們的細胞系使用ibiTreat μ-Slide 8 Well high八孔高壁腔室載玻片?! ?/span>

  

812c9114fe3fff8faf4e25a75bdd280e.png

μ-Slide 8 Well high(貨號: 80806)

  

  活細胞成像是使細胞的密度允許形成一個融合的單層,但不會導致細胞過度擁擠和團塊。在成像過程中需要使用合適的培養(yǎng)基。許多傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)基含有酚紅,它可引起高背景熒光。這使得在成像過程中很難從背景噪聲中分離出真實信號。因此,重要的是用PBS洗滌細胞,并用無酚紅培養(yǎng)基或市售的用于活細胞成像的培養(yǎng)基代替培養(yǎng)基?! ?/span>

  

QQ截圖20230628143327.jpg


聯(lián)


中文字幕无码精品亚洲资源网久久 | 少妇老师寂寞高潮免费a片 | 黑人勃起太大进不去| 久久精品亚洲AV三区麻豆| 熟妇人妻VA精品中文字幕| 99er热精品视频国产免费| 亚洲AV色欲色欲WWW| 最近免费观看高清韩国日本大全| 射不出来| 少妇高潮惨叫久久久久久| 国产成人精品一区二区三区不卡| 国产在线视频一区二区三区 | 深灬深灬深灬深灬一点| 国产精品久久久久乳精品爆| 我美艳丰满的吗咪| 国产精品无码AV片在线观看播| 年轻的小婊2韩剧中文版| 精品人妻VA出轨中文字幕| 色综合久久五月色婷婷| 欧美老妇性BBBBBXXX| 国产成人av| 玩弄高耸白嫩的乳峰a片| 国产精品VIDEOSSEX久久| 人人妻人人澡人人爽人人精品97 | 少妇中文字幕乱码亚洲影视| 亚洲av成人片色在线观看高潮| 久久国产精品久久久久久| 欧美freesex黑人又粗又大| 无码精品人妻一区二区三区漫画 | 老师含紧一点h边做边走 | 久久精品一区二区三区四区| 亚洲AV午夜精品一区二区三区| 国产精品天干天干在线播放| 天空影院播放免费完整版视频 | 欧洲人妻丰满AV无码久久不卡| 普通话做受对白xxxxx在线| 18禁黄污吃奶免费看网站| 被粗汉h玩松了| 亚洲日本一线产区二线产区| 免费午夜爽爽爽WWW视频十八禁| 按摩师舌头进去添的我好舒服|